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      EZ-RNA-B1  血液總RNA小量快提試劑盒

GalaxyBio Code包裝規格價格說明書購物車
RN31050680元
RN3182502800元

EZ-RNA-B1  血液總RNA小量快提試劑盒

EZ-RNA-B1
血液總RNA小量提試劑盒
試劑盒內容
50
Cat:RN310
250
Cat: RN318
Miniprep column
50
50×5
2 ml microfuge tube
50
50×5
溶液EL  Solution EL
140 ml
140 ml×5
溶液RLT Buffer RLT
15 ml
15 ml×5
溶液RN2 Buffer RN2
5 ml
5 ml×5
溶液RW1 Buffer RW1
40 ml
40 ml×5
溶液RPE  Buffer RPE
15 ml
15 ml×5
RNase-free Water
10 ml
10 ml×3
說明書     Protocol
1
1
 
貯存條件:
室溫,有效期2年。

 

產品簡介:     
※  GalaxyBio 公司與國際知名品牌公司通力合作,由對方提供全方面技術、關鍵純化材料,將核酸純化等系列產品,在國內推廣,實現了進口產品本土化生產。每種產品通過嚴格的技術把關,已達到進口產品的品質,而價格上卻是國產試劑盒的價位
※  采用獨特的細胞裂解沉淀技術,快速、方便,高得率、高純度??紗?00μl-400μl的血液中快速提取高質量的RNA。
  ※  提取的RNA分子完整、純度高,適用于Northern Blot 、RT-PCR、體外翻譯、Primer Extension、RNase?;げ舛?、構建cDNA文庫等各種分子生物學實驗。
注意事項:
1. 所有試劑用DEPC處理過的溶劑配制。請選用RNase-free槍頭和離心管,以避免提取過程中RNA被RNase降解。
2. 試劑含刺激性化合物,操作時要戴乳膠手套和眼鏡,避免沾染皮膚、眼睛和衣服,謹防吸入口鼻。若沾染皮膚、眼睛時,要立即用大量清水和生理鹽水沖洗,必要時尋求醫療咨詢。
3.試驗中需要異丙醇和乙醇,請提前準備RNase-free的異丙醇和乙醇。
操作步驟:
1.試驗前準備及注意事項
試劑盒在第一次使用前請按試劑瓶標簽說明在溶液RW1 溶液RPE中加入無水乙醇,并做好標記;溶液使用后,避免長期暴露于空氣中,用后請及時蓋緊蓋子,密閉保存。
2. 200-400 μl 全血加入3-4倍  Solution EL在離心管中混勻。
* 如果血樣的體積在200-400 μl之間,適當調整加入Solution EL的體積。
3. 冰浴10-15 min。冰浴期間,溫和混勻2次。3,000×g 離心5 min。用吸頭盡可能丟棄上相。
 
* 4℃條件下離心。
4. 再加入0.5 ml-1ml Solution EL,溫和混勻,冰浴5 min。
* 如果血樣的體積在200-400 μl之間,適當調整加入Solution ELL的體積。
* 此步驟可重復,盡量裂解除去紅細胞。
5. 3,000×g 離心5 min,盡量棄去上清,。
* 4℃條件下離心。
6. 加入250 μl Buffer RLT,用吸頭抽吸,混合均勻。
7. 加入80μl Buffer RN2,振蕩混勻10S, 12,000×g 離心10 min。
* 4℃條件下離心。
8. 取上清至1.5 ml離心管中。加入等體積無水乙醇,混合均勻。
步驟9-13可選擇離心法或負壓法
A. 離心法
9A. 將制備管置于2 ml (試劑盒內提供) 離心管中,轉移步驟8中的混合液到制備管中,6,000×g離心1min。
* 4℃條件下離心。
10A. 棄濾液,將制備管棄濾液,將制備管置回到2 ml離心管中,制備管中加入700 μl Buffer RW1,12,000×g離心1 min。
* 確認在Buffer中已按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇。
11A. 棄濾液,將制備管置回到2 ml離心管中,在制備管中加入700 μl Buffer RPE,12,000×g離心1 min;以同樣的方法再用700 μl Buffer RPE洗滌一次。
* 確認在Buffer W2 concentrate中已按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇。
12A. 棄濾液,將制備管置回到2 ml離心管中,12,000×g離心1 min。
13A. 將制備管放入干凈RNase-free的1.5 ml離心管中,在制備管膜中央加60-100 μl Buffer RTE (DNase﹠RNase-free) 。室溫靜置1 min,12,000×g離心1 min,洗脫得RNA
B. 負壓法
9B. 將制備管插到負壓裝置的插口上,將步驟8中的混合液移入制備管中,開啟并調節負壓至-20-30英寸汞柱,吸盡管中溶液。
10B. 保持負壓,加入700 μl Buffer RW1,吸盡管中溶液。
* 確認在Buffer Buffer RW1中已按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇。
11B. 保持負壓,沿管壁四周加入700 μl Buffer RPE,吸盡管中溶液;以同樣方法再用700 μl Buffer RPE洗滌一次。
* 確認在Buffer Buffer RPE中已按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇。
12B. 將制備管置于一個2 ml離心管(試劑盒內提供)中,12,000×g離心1 min。
13B. 將制備管放入干凈RNase-free的1.5 ml離心管中,在制備管膜中央加60-100 μl Buffer TE (DNase﹠RNase-free) 。室溫靜置1 min,12,000×g離心1 min,洗脫得RNA。
 
RNA定量及純度檢測
總RNA 的定量和定性分析: 所有標本均經紫外分光光度儀檢測所提取總RNA 的濃度及純度,ODA260/ODA280 的值為1.7~ 2.0。

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