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      EZ-RNA-B3  骨髓細胞總RNA小量快提試劑盒

GalaxyBio Code包裝規格價格說明書購物車
RN32550680元
RN3262502800元

EZ-RNA-B3  骨髓細胞總RNA小量快提試劑盒

EZ-RNA-B3
骨髓細胞總RNA小量提試劑盒
試劑盒內容
50
Cat:RN325
250
Cat: RN326
Miniprep column
50
50×5
2 ml microfuge tube
50
50×5
溶液RS  Solution RS
25 ml
25ml×5
溶液RR Buffer RR
25 ml
25 ml×5
溶液RW1 Buffer RW1
20 ml
20 ml×5
溶液RPE  Buffer RPE
15 ml
15 ml×5
RNase-free Water
10 ml
10 ml×3
說明書     Protocol
1
1
 
貯存條件:
室溫,有效期2年。
 
產品簡介:     
※  GalaxyBio 公司與美國公司通力合作,由美方提供全方面技術、關鍵純化材料,將核酸純化等系列產品,在國內推廣,實現了進口產品本土化生產。每種產品通過嚴格的技術把關,已達到進口產品的品質,而價格上卻是國產試劑盒的價位
※  由于骨髓的特殊成分,使得骨髓細胞的DNA和RNA提取比較困難,本產品采用獨特的細胞裂解沉淀技術,快速、方便,高得率、高純度。20分鐘可從200μl-400μl的骨髓細胞中快速提取高質量的RNA。
  ※  提取的RNA分子完整、純度高,適用于Northern Blot 、RT-PCR、體外翻譯、Primer Extension、RNase?;げ舛?、構建cDNA文庫等各種分子生物學實驗。
注意事項:
1. 所有試劑用DEPC處理過的溶劑配制。請選用RNase-free槍頭和離心管,以避免提取過程中RNA被RNase降解。
2. 試劑含刺激性化合物,操作時要戴乳膠手套和眼鏡,避免沾染皮膚、眼睛和衣服,謹防吸入口鼻。若沾染皮膚、眼睛時,要立即用大量清水和生理鹽水沖洗,必要時尋求醫療咨詢。
3.試驗中需要異丙醇和乙醇,請提前準備RNase-free的異丙醇和乙醇。
操作步驟:
1.試驗前準備及注意事項
試劑盒在第一次使用前請按試劑瓶標簽說明在溶液RW1 溶液RPE中加入無水乙醇,并做好標記;溶液使用后,避免長期暴露于空氣中,用后請及時蓋緊蓋子,密閉保存。
2.約200μl 骨髓細胞加入400μl Buffer RS 在離心管中混勻。溫和充分震蕩幾次。
*Buffer RS 占的比例越大,RNA穩定。大于4倍時,可以4保存12
 
.一般情況可以-20-80長期保存。
3.加入400ul溶液RR,顛倒混勻。
* 禁止使用蝸旋器,防止基因組斷裂混入。4℃條件下離心。
4. 大于12000×g 離心10 min。
* 4℃條件下離心
5. 取上清至1.5 ml離心管中,加入0.6體積的異丙醇(或加入1體積無水乙醇),混合均勻。此步提取幾百個堿基的小片段RNA是必須的。
 
步驟6-10可選擇硅膠膜離心柱吸附法(較為純凈)直接離心沉淀法(相對前者提取量較多)
A. 硅膠膜離心柱吸附法(較為純凈)
6A. 將制備管置于2 ml (試劑盒內提供) 離心管中,轉移步驟5中的混合液到制備管中,6,000×g離心1min(如果液體較多可以分兩次轉移和離心)。
* 4℃條件下離心。
7A. 棄濾液,將制備管棄濾液,將制備管置回到2 ml離心管中,制備管中加入700 μl Buffer RW1,12,000×g離心1 min。
* 確認在BufferRW1 中已按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇。
8A. 棄濾液,將制備管置回到2 ml離心管中,在制備管中加入700 μl Buffer RPE,12,000×g離心1 min;以同樣的方法再用700 μl Buffer RPE洗滌一次。
* 確認在BufferRPE中已按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇。
9A. 棄濾液,將制備管置回到2 ml離心管中,12,000×g離心1 min。
10A. 將制備管放入干凈RNase-free的1.5 ml離心管中,在制備管膜中央加30-100 μl RNase-free Water(加入液體越少,濃度越大) 。室溫靜置1 min,12,000×g離心1 min,洗脫得RNA
 
B. 直接離心沉淀法(相對前者提取量較多)
6B. 大于12000×g 離心10 min。
* 4℃條件下離心
7A. 棄濾液,離心管中加入700 μl Buffer RW1,懸浮沉淀,12,000×g離心5 min。
* 確認在Buffer RW1中已按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇。
8A. 棄濾液,離心管中加入700 μl Buffer RPE,懸浮沉淀12,000×g離心5 min。
* 確認在Buffer RPE中已按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇。
9A. 盡棄濾液,室溫干燥去除乙醇。
10A.加入10-100 μl RNase-free Water,溶解沉淀,即得RNA
 
RNA定量及純度檢測
總RNA 的定量和定性分析: 所有標本均經紫外分光光度儀檢測所提取總RNA 的濃度及純度,ODA260/ODA280 的值為1.7~ 2.0。
 
 
 
 
 


 

EZ-RNA-B3
骨髓細胞總RNA小量提試劑盒

試劑盒內容
50
Cat:RN325
250
Cat: RN326
Miniprep column
50
50×5
2 ml microfuge tube
50
50×5
溶液RS  Solution RS
25 ml
25ml×5
溶液RR Buffer RR
25 ml
25 ml×5
溶液RW1 Buffer RW1
15 ml
15 ml×5
溶液RPE  Buffer RPE
15 ml
15 ml×5
RNase-free Water
10 ml
10 ml×3
說明書     Protocol
1
1

 
貯存條件:
室溫,有效期2年。

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