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      首頁產品分類目錄→Glue活化辣根過氧化物酶(B 型)---2小時快速標記抗原、抗體、多肽及化學小分子

      Glue活化辣根過氧化物酶(B 型)---2小時快速標記抗原、抗體、多肽及化學小分子

GalaxyBio Code包裝規格價格說明書購物車
WB220532ugx5200元
WB220532ugx10320元
WB221064ugx5200元
WB221064ugx10320元
MD0101mgx51500元
MD0101mgx102500元
MD0203mgx32200元
MD0203mgx53200元
MD0203mgx106000元
MD05050mg11000元
MD100100mg20000元

Glue活化辣根過氧化物酶(B 型)---2小時快速標記抗原、抗體、多肽及化學小分子

Glue
活化辣根過氧化物酶
(B 型)
貨號
規格
(HRP/支)
數量
(支)
價格
標記抗體的量/支
(160KDIgG為標準)
Cat:WB2205
32ug
5
200
約5 ug/支
 
10
320
Cat:WB2210
64ug
5
200
約10ug/支
 
10
320
Cat:MD010
1mg
5
1500元
約100ug~0.5mg/支
10
2500元
Cat:MD020
3mg
3
2200元
約300ug~1.5mg /支
 
5
3200元
10
6000元
Cat:MD030
10 mg
1
2200元
約1~4mg /支
Cat:MD040
100 mg
1
20000元
約10~50mg mg/支
Cat:MD050
50 mg
1
11000元
約5~25mg mg/支
 
貯存條件:
低溫運輸,-20℃貯存,有效期一年。
生產日期:見包裝
產品簡介     
※  Galaxybio 公司研發的活化HRP,對優質辣根過氧化物酶次序偶聯,再活化,使辣根酶富含活性基團。一經活化的HRP,極易和含氨基NH2的小分子或蛋白氨基NH2的共價結合。因此使用本方法標記物,具有標記率高、活性好、本底低及非常敏感等特點。敏感性一般是傳統過碘酸法標記3~5倍。微量包裝的活化HRP,特別適合科研用的昂貴抗體的標記。也適合抗體抗原活性的檢測。
※  一步標記,簡便快速。與待記抗原或抗體混合后(約12個小時過夜標記或37℃2小時。)
※  可以微量標記,節省昂貴的抗原抗體
※  無需透析,即時使用;
※  標記率極高,可大于95%;敏感性一般是傳統過碘酸法標記3~5倍。
※  本試劑盒針對氨基進行標記,故只對含有氨基的分子??梢越鋅乖蚱淥鞍椎謀曇?。小分子的標記,如瘦肉精、DNA、多肽等等,標記時,如要提高HRP的利用率,可以加入過量的小分子,然后透析除去游離的小分子;如果要即時使用,參考蛋白抗原的標記,減少小分子的用量,從而減少游離的小分子。
※  本底遠遠低于其它方法。
注意事項:
1. 抗原抗體如果是存在于硫酸銨、甘氨酸或Tris緩沖液中,需以PBS緩沖液充分透析,也可以超濾離心管進行超濾;微量的含NH2 的小分子,會嚴重影響標記率。
2. 反應體系一般100μl~300ul /1mgHRP;太小,可能發生自身交聯;也不要太大,太大會影響標記率。
3. REAGENT Ⅲ 終止液,封閉殘余活化基團。
4. 注意反應 pH值約維持在9.5左右。pH值太低,多加反應啟動劑。
 
5.特別提醒,是后續試驗中,酶標板條種類不同,本底差異特別大。當本底高時,以較高濃度蛋白溶液封閉的酶標板,同時把酶標稀釋液的蛋白濃度加大。如果問題依舊存在,請聯系我們技術咨詢。
6 本試劑僅用于科學研究;
操作步驟
以1mg活化HRP,標記抗體為例(反應體系根據HRP的mg數相應增加)
        1. 準備待標記物:以蒸餾水或超純水把待標記物溶解成約1mg/ml。
2. 取100ul抗體溶液(1mg/ml)轉入REAGENT Ⅰ活化辣根氧化物酶。
※簡短離心,使辣根過氧化物酶沉到管底,辣根酶管壁上的干粉HRP要完全沖洗溶解。
※總的反應體系控制在100ul/mg活化HRP左右,體系增大影響標記率。
※按照按mg活化HRP對應抗體100ug~500 ug、抗原50ug~250ug,HRP:X的分子mol比保持在30:15~1左右。
3. 以REAGENTⅡ調pH值至9.5左右(大約10ul,因抗體用的緩沖液的差別,量有所不同,但確保PH在9.0以上,可以多加REAGENTⅡ,并準確記錄REAGENTⅡ的使用量,以備下一步用)。 37℃2小時、或4℃過夜。 
※檢測PH的方法:取一新管尖,吸取標記物溶液,然后排盡液體,拿管尖點在PH試紙上,比對即可。
4. (備選步驟)加入微量硼氫化鈉。(適合酶標物長期放置的,即時使用無需添加。取200ul的槍頭,插入硼氫化鈉粉末,在管尖處有看得見白色粉末,再轉移到酶標物物,吹打溶解混勻即可)。
5. 加入REAGENTⅢ(約3倍體積的REAGENTⅡ。例如上一步用去REAGENTⅡ10ul,這一步加入REAGENTⅢ30~50ul。但確保酶結合物PH在7.0左右,可以多加REAGENTⅢ調整),混勻終止反應。
6. (備選步驟,甘油能更好穩定酶結合物活性)加甘油至50%,-20℃保存。
注:如果抗原(或抗體)為溶液狀態,從步驟2開始操作。
特別提醒:后續試驗中,酶標板條種類不同,本底差異特別大。當本底高時,以較高濃度蛋白溶液封閉的酶標板,同時把酶標稀釋液的蛋白濃度加大,增加洗滌次數。如果問題依舊存在,請聯系我們技術咨詢。
推薦使用:包被了蛋白、或抗原、或抗體的酶標板的穩定,和稀釋液的抗原或抗體的穩定,請購買本公司的相關產品。底物顯色,本公司提供單組分TMB
和雙組分TMB AB液,4~8℃可穩定數年。
 
附帶緩沖液清單:
 
REAGENT Ⅰ活化辣根過氧化物酶
見包裝
REAGENT Ⅱ反應啟動劑
1.0ml(PH9.6)
REAGENT Ⅲ 終止液
1.0ml(PH7.0)
硼氫化鈉
少許。
說明書
1份
 
 
 
Glue A型和B型活化辣根過氧化物酶標記特點
 
Glue A
Glue B
標記速度
快、1小時可完成標記
慢 、過夜
標記條件控制
稍難
容易
標記效果
稍低于B
較好
 
 

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