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      長臂生物素標記試劑盒-----用于HRP、蛋白、核酸及核酸探針、抗體、抗原的標記

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SA8211mgx10380元
SA8221mgx20650元

長臂生物素標記試劑盒-----用于HRP、蛋白、核酸及核酸探針、抗體、抗原的標記

長臂生物素標記試劑盒
Long-armed Biotin Label Kit
 
Cat
試劑盒組分
規格
SA821
REAGENTⅠ長臂生物素
1mg×10
SA822
REAGENTⅠ長臂生物素
1mg×20
SA823
REAGENT Ⅱ 溶媒
1.5ml
SA814
REAGENT Ⅳ 2MNa2CO3
1.5ml
貯存:-20℃保存,穩定期1年
 
 
 
 
 
 

操作方法:
 1) 準備待標抗體、HRP等等:
將待標抗體配成1mg/m1溶液。
 2)生物素的活化
從-20℃取出REAGENT Ⅱ溶媒,37℃水浴5分鐘至完全溶解,取100ul,加入到REAGENT Ⅰ生物素中,輕輕吹打至完全溶解?;煸仁椅路胖?5分鐘。注:反應時間要充分,準確。
3)標記
將活化的生物素全部轉入1ml待標物中,加入REAGENT Ⅳ100ul, PH約在8.0-9.0,室溫震蕩1~3h。(1小時能完成95%的反應,2小時99%,)
4) 透析:4℃條件下使上述混合液體以PBS透析過夜,中間換液若干次(如有沉淀,離心除去后再透析)。
5) 保存:加等體積甘油,-20℃分裝存放。
 
 
 
應用范圍:
用于HRP、蛋白、核酸及核酸探針、抗體、抗原的標記,也適用含有氨基(NH4-)的小分子標記。
特點:
1.操作簡便,標記率高,活性好。
2. 易于保存和運輸,減少生物素的失活。
 
 
 
 
 
 
 
 
  
 
 
注意事項:
1)透析袋選擇:
一定注意透析袋孔徑的大小,防止蛋白過多滲出。一般透析袋孔徑約為待標記蛋白分子量的1/10。如HRP       分子量是44KD,選擇3k;抗體150KD,選擇15K。  
2)透析要充分,防止游離生物素,競爭反應。
3)本方法是針對待標記物的氨基進行標記。因此待標記物的緩沖液,如果是存在于硫酸銨、甘氨酸或Tris等等有氨基的緩沖液中,需以PBS緩沖液充分透析,防止干擾標記。
4)標記時,如果PH偏酸、低于在7.5,再加入REAGENT Ⅳ100ul或適量。
 

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