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      小片段DNA小量回收試劑盒

GalaxyBio Code包裝規格價格說明書購物車
FR05050420元
FR060100760元

小片段DNA小量回收試劑盒

小片段DNA小量回收試劑盒
           (結合樹脂&離心柱型)
 
 
 
試劑盒內容
50
Cat.FR050
100
Cat.FR060
結合樹脂 Resin  
10 ml
10mlx2
漂洗緩沖液 Wash Buffer
15 ml
15 ml x2
洗脫緩沖液 Elution Buffer
15 ml
15 ml x2
吸附柱     Spin Column
50
50 x2
收集管   Collection Tube(2ml)  
50
50 x2
說明書     Specification
1
1
 
貯存條件:
室溫,有效期一年。
 
產品簡介     
※  本公司與由美國公司通力合作,由美方提供全方面技術、關鍵純化材料,將核酸純化等系列產品,在國內推廣,實現了進口產品本土化生產。每種產品通過嚴格的技術把關,已達到進口產品的品質,而價格上卻是國產試劑盒的價位。
※  能從液體中回收小片段DNA,8bp 的DNA小片段回收率達60%。20-100bp可達80%。
※  采用進口硅膠膜和吸附樹脂,最大吸附量為60ug,實驗結果重復性好。
 
操作步驟:
1. 試驗前準備及注意事項
 a.  Resin  使用前請按標簽加入無水乙醇并標示。
 b.  Wash Buffer 使用前請按標簽加入無水乙醇并標示。
2. 吸附 Resin加入乙醇后,劇烈混勻。7倍體積的Resin乙醇溶液于樣品中(7倍于樣品),混勻。待液體降至室溫,轉入吸附柱中, 12,000轉/分 離心30秒,棄去離心管中液體。
3.  漂洗  將700μl的Wash Buffer加入吸附柱Spin Column中,12000rpm離心30-60秒,棄濾液。
4.  再漂洗  將500μl的Wash Buffer加入Spin Column中,12000rpm離心30-60秒,棄濾液。 空柱12000rpm再離心2分鐘,除去殘留乙醇。
5.  洗脫  將Spin Column按置于新的潔凈的1.5ml的離心管上,在吸附柱Spin Column膜的中央處加入50-100μl的滅菌水(pH8.5)或洗脫緩沖液Elution Buffer,室溫靜置1分鐘,12000rpm離心1分鐘洗脫DNA,可立即用于下游分子生物學實驗或-20℃保存。
    注意:Elution Buffer 組成為2.5mM Tris-HCI (pH8.5),不影響測序和酶切反應..把水或洗脫液加熱于60℃使用時有利于提高洗脫液效率,
 
DNA濃度和純度檢測
   OD260值為1,相當于50ug/ml的雙鏈DNA。
   OD260/ OD280比值一般為1.7-1.8,如果洗脫時不使用緩沖液,而使用去離子水,由于受PH值和離子濃度的影響,比值會偏低。
 
 
常見問題分析及解決方案
問 題
可能原因
解決方法
 未得到DNA片斷
 
洗脫液Elution Buffer使用不當
漂洗緩沖液 Wash Buffer用前未加無水乙醇
樣品起使量少
步驟5中,請將洗脫液EB加至吸附柱Matrix的中間部位,以確保完全滲入吸附材料中
請按試劑瓶標簽說明在漂洗漂洗緩沖液中加無水乙醇,并做好標記.
DNA產量低
洗脫效率不高
使用NAOH將滅菌雙蒸水PH調至8.5后再進行洗脫.
建議將洗脫緩沖液用1.5ml離心管分裝后使用,以避免被高鹽或酸性溶液污染.
結合樹脂 Resin沒有完全懸起,含量減少。
純化得到的DNA片斷不單一
PCR引物二聚體片斷較大
PCR產物含有非特異性擴增片段
改用瓊脂糖凝膠回收試劑盒純化片段.
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

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