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      快速高效瓊脂糖凝膠DNA

GalaxyBio Code包裝規格價格說明書購物車
FG11050580元
FG1202001950元

快速高效瓊脂糖凝膠DNA

快速高效瓊脂糖凝膠DNA
小量回收試劑盒
         (離心柱型
 
試劑盒內容
50 貨號cat:FG110
200次貨號cat:FG120
過濾柱    Filter    Column
50
200
收集管   Collection Tube(2ml)  
50
200
吸附柱        Spin Column
50
200
收集管   Collection Tube(2ml)  
50
200
溶液PB     Buffer PB  
35 ml
140 ml
漂洗緩沖液    Wash Buffer
15 ml
30 ml×2
洗脫緩沖液    Elution Buffer
15 ml
15 ml×2
說明書     Specification
1
1
 
貯存條件:
室溫,有效期一年。
 
 
產品簡介     
※  GalaxyBio公司與由美國公司通力合作,由美方公司提供全方面技術、關鍵純化材料,將核酸純化等系列產品,在國內推廣,實現了進口產品本土化生產。每種產品通過嚴格的技術把關,已達到進口產品的品質,而價格上卻是國產試劑盒的價位。
※  無需溶膠,直接過柱粉碎。目的DNA帶從凝膠上切下來后,通過離心粉碎,一次溶出,再采用硅膠膜吸附柱吸附,DNA便可用去離子水(或低鹽緩沖液)洗脫出。能從各個等級的瓊脂糖凝膠中回收到200bp-40kp的DNA帶,且回收率達90%,小于200bp片段請用本公司的同類產品小片段回收。
※  最大吸附量為60ug,實驗結果可重復性好。
  ※  純度好, 直接可以用于酶切、轉化、PCR、體外轉錄、測序等各種分子生物學實驗。
 
操作步驟:
1. 試驗前準備及注意事項
 ■請盡量采用濃度<1.5%的瓊脂糖凝膠,濃度越小回收效果越好。
■Wash Buffer 使用前請按標簽加入無水乙醇并標示。
2. 切膠  將瓊脂糖凝膠電泳后的單一目的片段切出(盡量切除多余部分),稍切碎,轉入過濾離心管中。
3. 破碎 大于12,000轉/分 全速離心5min。速度越大,效果越好。DNA同緩沖液一起溶出到收集管中。
注意:此時可以直接-20℃凍存,也可以進一步過柱純化,或乙醇沉淀純化。
4. 吸附 往上述收集管中加入1~5體積的溶液PB (Buffer PB) ,全部轉入吸附柱中, 12,000轉/分 離心30秒,棄去離心管中液體。
注意:對于幾百bp小片段,增大溶液PB (Buffer PB)體積,可以更好回收。
 
5.  漂洗  將700μl的Wash Buffer加入吸附柱Spin Column中,12000rpm離心30-60秒,棄濾液。
6.  再漂洗  將500μl的Wash Buffer加入Spin Column中,12000rpm離心30-60秒,棄濾液。 空柱12000rpm再離心2分鐘,除去殘留乙醇。
7.  洗脫  將Spin Column按置于新的潔凈的1.5ml的離心管上,在吸附柱Spin Column膜的中央處加入50-100μl的水或洗脫緩沖液Elution Buffer,室溫靜置1分鐘,12000rpm離心1分鐘洗脫DNA,可立即用于下游分子生物學實驗或-20℃保存。
    注意:Elution Buffer 組成為1 mM EDTA和2.5mM Tris-HCI (pH8.5),不影響測序和酶切反應。把水或洗脫液加熱于60℃使用時有利于提高洗脫液效率,如果提取的質粒>10kb,請將洗脫液預熱至65℃,并適當延長洗脫時間。
注意事項:
1. 請盡量采用濃度<1.5%的瓊脂糖凝膠,濃度越小回收效果越好。
2. 瓊脂糖凝膠要求新配制、剛剛跑過電泳的。電泳緩沖液,也要求新配制的。
3. 如下一步實驗要求較高,則應盡量使用TAE電泳緩沖液。
4. 切膠時,紫外照射時間應盡量短,以免對DNA造成損傷。
5. 溶液PB為刺激性液體,皮膚等接觸后請用大量水沖洗,或直接就醫
 
 
 
 
 
 
 
 
DNA濃度和純度檢測
   OD260值為1,相當于50ug/ml的雙鏈DNA。也可以通過DNA Marker通過瓊脂糖凝膠電泳半定量。
   OD260/ OD280比值一般為1.7-1.8,如果洗脫時不使用緩沖液,而使用去離子水,由于受PH值和離子濃度的影響,比值會偏低。
 
 
 
 
 

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